检验医学２０１２年９月第２７卷第９ 文章编号：１６７３ ８６４０（２０１２）０９－０７７３－０３ 中图分类号：Ｒ４４６．１ 文献标志码：Ａ 痰培养标本合格性评估标准的比较 杨 朵， 辛续丽， 马东媛， 王松雪， 陈 亮 （首都医科大学附属北京世纪坛医院，北京１０００３８） 关键词：痰；涂片；细胞学筛选 在肺部病原学诊断中，咳痰与创伤性防污染 平均每个低倍视野下出现鳞状上皮细胞（ＳＥＣ） 套管毛刷（ＰＳＢ）、环甲膜穿刺经气管吸引物 （ｒＩ１１’Ａ）或经皮肺穿刺吸引（ＬＡ）相比较，仍是目前 应用最多、最简便的下呼吸道取样方法。然而由 和白细胞（ＷＢＣ）的多少或比例，判断送检痰标 本的质量即唾液污染程度。文献…介绍的６种痰 培养标本细胞学筛选标准见表１，简化综合后的 筛选标准见表２。 于口咽部存在大量定植菌，咳痰标本不可避免会 遭受其污染，如何判断痰标本是否适合进行培养 以及正确区分痰培养结果中的污染菌与感染菌， 成为临床微生物学实验室工作的一个重点和难 点。目前，国内、外较普遍的做法是痰培养前涂片 ３．痰培养采用常规培养方法（液化后接种血 平板、巧克力及麦康凯平板，３７℃５％ＣＯ 孵育 １８～２４ ｈ观察结果）。 ４．正常菌群的判断 非Ｂ一溶血性链球菌 （除外肺炎链球菌）、非致病奈瑟菌、微球菌、白喉 进行细胞学检查筛选标本。本实验比较了文献介 绍的６种判断标准，并对痰涂片染色镜检的作用 进行了评价。 一棒状杆菌以外的棒状杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌 为口腔常居菌 。 ５．下呼吸道感染潜在病原菌 当痰标本 、材料和方法 １．菌株来源２０１０年６月１日至２０１０年９ 中出现肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、Ｂ一溶血性链球 月１日北京世纪坛医院微生物室常规临床送检并 同时进行细胞学检查的痰培养标本１５３例。 菌＋一＋＋＋＋，或金黄色葡萄球菌、肠杆菌科细 菌、不动杆菌、假单胞菌或其他革兰阴性杆菌＋＋ ～２．痰细胞学检查 挑取痰液可疑部位（脓、 黏液）涂片，革兰染色后进行显微镜检查。根据 ＋＋＋＋，确定为分离的下呼吸道潜在病原菌。 表１文献［１］介绍的６种痰培养标本细胞筛选标准 标准 出处 不合格（每低倍视野） 合格／可接收（每低倍视野） 作者简介：杨朵，女，１９７０年生，博士，副主任技师，主要从事临床微生物检验工作。 检验医学２０１２年９月第２７卷第９期Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１２，Ｖｏｌ ２７．Ｎｏ ９ 表２文献［１］介绍的６种痰培养标本细胞筛选标准（简化综合后） 标准 出处 不合格（每低倍视野） 合格／可接收（每低倍视野） ６．统计学方法 不同标准下标本的合格率 比较，合格标本与不合格标本间潜在致病菌检出 率的比较采用卡方检验，Ｐ＜０．０５表示差异有统 计学意义。 二、结果 判断标准的最低可接受限以方便临床工作中使 用。按文献所提及的６种判断标准，除外标准５， 依照其余判断标准本研究中咳痰标本的合格率间 差异无统计学意义，显示临床工作中虽然可能使 用不同判断标准（除外标准５），但合格率差异并 无统计学意义。 文献 报道，提高痰标本合格率有助于提高 培养阳性率。本研究显示，除标准２与标准５合 格标本与不合格标本潜在致病菌检出率差异无统 １．依据不同标准，对标本进行合格与否判断 以及培养出潜在致病菌情况见表３。 表３依据不同标准判断后，合格与 不合格标本的潜在致病菌检出率 标准 合格 不合格 值 Ｐ值 （％） 计学意义外，依据其余４种判断标准合格标本与 不合格标本痰培养潜在致病菌检出率差异有统计 学意义，证实提高痰标本送检质量确实有助于提 高培养阳性率。但我们认为，强行拒收所有不合 格标本并不现实，原因如下：（１）每日标本量巨大 时，不能保证每份标本按时在接种前均能完成镜 检；（２）退回重取易与尽量在用药前采集细菌学 检验标本的原则发生冲突；（３）在不合格标本中， 均有一定比例可检出潜在致病菌，特别是某些标 本在检出潜在致病菌的同时涂片可观察到ＷＢＣ 吞噬现象。目前认为有ＷＢＣ吞噬、伴行的细菌 注：Ｘ 值为除标准５外，其余各标准标本合格率间比较结果 与感染具有高度的相关性 Ｊ，强行拒收此类标本 可能导致“潜在合格”标本的丢失。为了达到既 ２．检出潜在致病菌的不合格标本中，部分标 本可观察到ＷＢＣ吞噬现象。依据标准２与标准 ３判断后，分离到潜在致病菌的不合格标本中，均 有６例标本涂片观察到ＷＢＣ吞噬现象。依据标 准１、标准４、标准５、标准６判断后，分离到潜在致 病菌的不合格标本中，均有５例涂片观察到ＷＢＣ 吞噬现象。 三、讨论 统计标本的不合格率，以利回顾性教育临床护士 提高标本送检合格率的目的，又减少“潜在合格” 标本漏检情况，在实验室实际工作中可以采用先 统一对患者咳痰标本进行接种，随后记录下该标 本的细胞学检查结果的方法。 依据各类标准，在可接受标本中均有部分标 本未培养出潜在致病菌。以标准６为例：可接受 目前各类文献所提及的各类咳痰标本合格与 否判断标准，在使用中均较繁琐，本研究列出各类 标本中１２例未培养出潜在致病菌，其中６例经革 兰染色观察后发现，可见到较大量呈长丝状， 检验医学２０１２ 旦箜 ！鲞笙！ 不佳的革兰阴性杆菌，可能为抗菌药物压力之下 细菌形成Ｌ型，导致普通培养无法生长。其余６ 例原因不详。该结果显示，痰标本涂片革兰染色 镜检有助于培养结果的解释。 本研究结果显示不可接受标本中均有一定比 例可检出潜在致病菌。由于不合格标本是受到唾 参考文献 ［１］胡必杰，王金良，倪语星，等．下呼吸道感染实验诊 断规范［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，２００６：２２— ２３． ［２］胡必杰，何礼贤，詹雪妹，等．痰培养标本质量评估 的量化标准探讨——１４ ００１份痰细胞学检查与细 菌培养结果的比较研究［Ｊ］．中华微生物学和免疫 学杂志，２００１，２１（ｓ１）：３６—３９． 液污染的标本，在此类标本中检出的潜在致病菌 是真正的致病菌还是口腔定植菌？目前关于口腔 正常菌群分布类型均以健康人群为基础得出，而 医院环境、高抗菌药物压力之下住院患者口腔正 常菌群分布有所不同，文献【 报道４９．９％老年非 感染住院患者口腔中可分离到革兰阴性杆菌；金 ［３］杨肇立，周文，郑遥奇，等．健康人群３２２例口咽 部非厌氧菌半定量调查报告［Ｊ］．四川医学，２００２， ２３（５）：５４８３４９． ［４］ Ｍｕｒｒａｙ ＰＲ．Ｍａｎｕ￣ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ［Ｍ］．８ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ：ＡＳＭ Ｐｒｅｓｓ，２００３：４７． 冬等 报道，住院患者入院后第１天和第５天口 咽革兰阴性杆菌定植率分别为９．８％、２２．８％（以 克雷伯菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为主），住 ［５］刘扬，魏殿军，马全玲．革兰染色痰涂片镜检与痰 培养的荟萃分析［Ｊ］．诊断学理论与实践，２００７，６ （２）：１５２—１５４． 院第５天患者口咽革兰阴性杆菌定植呈明显上升 趋势。所以，不合格标本中分离到的潜在致病菌， 特别是抗菌药物压力之下的泛耐药菌，不一定为 患者真正的致病菌。我们认为，涂片中观察到有 ＷＢＣ吞噬、伴随现象时，应认定为可能致病菌，对 其进行药敏试验，其他潜在致病菌因无法判断是 ［６］ Ｅｈａｒａ Ｎ，Ｆｕｋｕｓｈｉｍａ Ｋ，Ｋａｋｅｙａ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ａ ｎｏｖｅｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｒａｐｉｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ＊ ａｎｔｉｇｅｎ ｉｎ ｓｐｕｔｕｍ ａｎｄ ｉｔｓ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｒｅｓｐｉｒａｔｏ— ｒｙ ｔｒａｃｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｊ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００８，５７（Ｐｔ ７）：８２０—８２６． ［７］ 董蘅，程梅芬，顾静文，等．老年非感染住院患者 否为真正的致病菌，可仅报告菌名暂不进行药敏 试验，这样既不会漏检真正的致病菌，又不会误导 临床导致抗菌药物滥用。 综上所示，不同痰细胞学判断标准间差异并 口咽部带菌情况研究［Ｊ］．中华医院感染学杂志， ２００８，１８（１）：５９—６１． ［８］ 金冬，刘雪琴，刘洪光，等．住院精神病患者口咽 部革兰阴性杆菌定植研究［Ｊ］．护理学杂志，２００６， ２１（１５）：４－６． 无统计学意义（除标准５外）。痰标本进行革兰 染色检查，不仅有助于督促提高送检质量，同时可 协助判断致病菌。 （收稿日期：２０１１—１１－２２） （本文编辑：储始星） ＩＦＣＣ糖化血红蛋白网络会议召开 国际临床化学与检验医合会（ＩＦＣＣ）糖化血红蛋白（ＨｂＡ１Ｃ）网络会议于２０１２年７月１５日在美国加利 福尼亚州洛杉矶市召开。本次会议的参会国有英国、荷兰、美国、中国、日本、法国、德国、印度和韩国。本中心 常务副主任王华梁、临床生化室居漪主任及李卿代表中国参会。会议主题为ＩＦＣＣ溯源体系的建立及完善，内 容包括ＩＦＣＣ标准操作规程的更新、２０１１年柏林研究总结、２０１２年加利福尼亚研究第１次结果汇报、ＩＦＣＣ校准 品和质控品的稳定性、／ＦＣＣ与日本国家糖化血红蛋白参考方法的关系研究等。此外，实验室网络联络官Ｃａｓ Ｗｅｙｋａｍｐ博士还汇报了与检验医学溯源联合委员会（ＪＣＴＬＭ）会晤的结果，即：确定将ＩＦＣＣ参考方法——质谱 法和毛细管电泳，ＮＧＳＰ ＢｉｏＲｅｘ７０方法等列入ＪＣＴＬＭ参考测量程序名单。来自印度的Ｂｈａｓｋｅｒ博士介绍了ＩＦＣＣ 单位（ｒｅｏｔｏｌ／ｔｏｏ１）在印度的现状及运用情况。 目前，我国也已作出了积极的尝试和努力，探索适合我国国情的ＨｂＡ１Ｃ标准化方法，包括上海地区的 ＨｂＡ１ｃ一致性计划等。本中心的ＨｂＡ１Ｃ参考实验室在成为ＩＦＣＣ实验室网络成员后，积极与ＩＦＣＣ沟通、合作， 为实现与国际接轨作出努力。该实验室于今年４月参加了ＩＦＣＣ ＨｂＡ１ｃ实验室网络组织的本年度第１次研究 活动，从本次会议上公布的相关数据显示，实验数据结果较理想，与去年相比有较大提高。通过本次网络会议， 本中心进一步明确了将充分利用ＨｂＡ１ｃ参考实验室为提高上海地区ＨｂＡ１Ｃ检测质量而服务的目标。 （上海市Ｉ临床检验中心）
