原药材检验标准操作规程
益母草检验标准操作规程 执行日期 审核 批准 部门 姓名 签名 日期 起草 质量控制部 分发部门 质量控制部 质量保证部 生产制造部 质量负责人 质量控制部、质量保证部 目 的： 建立一个中药饮片原药材检验标准操作程序，确保检验结果准确可靠。
适用范围：中药原药材。
责 任 人：质量保证部主任、质量控制部主任、化验员。
标准来源：《中华人民共和国药典》2010年版一部、《安徽省中药饮片炮制规范》。
内 容： 1、性状
取本品适量，放入白瓷盘中，用眼观察，可见以下性状特征：
鲜益母草 幼苗期无茎，基生叶圆心形， 5~9浅裂，每裂片有2~3钝齿。花前期茎呈方柱形，上部多分枝，四面凹下成纵沟，长30~60cm，直径0.2~0.5cm；表面青绿色；质鲜嫩，断面中部有髓。叶交互对生，有柄；叶片青绿色，质鲜嫩，揉之有汁；下部茎生叶掌状3裂，上部叶羽状深裂或浅裂成3片，裂片全缘或具少数锯齿。气微，味微苦。
干益母草 茎表面灰绿色或黄绿色；体轻，质韧，断面中部有髓。叶片灰绿色，多皱缩、破碎，易脱落。轮伞花序腋生，小花淡紫色，花萼筒状，花冠二唇形。切段者长约2cm。
2、鉴别
主要使用仪器：电子分析天平、电子显微镜等。 2.1显微鉴别：
2.1.1 试液配制
2.1.1.1 水合氯醛试液：取水合氯醛50克，加水15毫升与甘油10毫升使溶解，即得。
2.1.1.2 甘油醋酸试液：取甘油、醋酸及水各等份混匀，即得。
2.1.1.3 稀甘油：取甘油33毫升，加水稀释至100毫升，再加樟脑一小块或液化苯酚1滴，即得。
2.1.2 供试品制备
2.1.2.1 取本品10g，研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水合氯醛搅拌均匀 ，置酒精灯上加热透化；加稀甘油数滴， 搅拌均匀，分装2~3片，加盖玻片，即得。
2.1.2.2 取研细的粉末少量置载玻片上，加甘油醋酸试液，搅拌均匀，加盖玻片，即得。
2.1.2.3取研细后取少量粉末，置载玻片上，滴加水搅拌均匀，同时滴加少许稀甘油，加盖玻片，即得。
2.1.2.4横切面制备：取供试品欲观察部位，经软化处理后，用徒手切片法切成10~20μm的薄片，选取平整的薄片置载玻片上，滴加水合氯醛试液后，在酒精灯上加热透化，并滴加稀甘油，盖上盖玻片。
2.1.3 置显微镜下观察
可见本品茎的横切面：表皮细胞外被角质层，有毛茸；腺鳞头部4细胞、6细胞或8细胞，柄单细胞；非腺毛1~4细胞。下皮厚角细胞在棱角处较多。皮层为数列薄壁细胞；内皮层明显。中柱鞘纤维束微木化。韧皮部较窄。木质部在棱角处较发达。髓部薄壁细胞较大。薄壁细胞含细小草酸钙针晶及小方晶。鲜品近表皮部分皮层薄壁细胞含叶绿体。
2.2薄层鉴别
取盐酸水苏碱[含量测定]项下的供试品溶液10ml，蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液（鲜品干燥后粉碎，同法制成）。另取盐酸水苏碱对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5~10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸（10：6：
1）为展开剂，展开，取出，晾干，在105℃ 加热15分钟，放冷，喷以稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液（10:1）混合溶液至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3、检查
主要使用仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱、马弗炉、坩埚等。 3.1 水分
干益母草 取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中厚度不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在100~105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，按下式计算即得。 W2－W3
供试品中的含水量（%）＝────────×100％ W2－W W 称量瓶重（g）
W2 烘前称量瓶和样品重之和（g） W3 烘后称量瓶和样品重之和（g） 本品含水量不得过13.0%。 3.2总灰分
干益母草 取供试品适量，粉碎使能通过二号筛混合均匀后，取3～5g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500~600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，按下式计算即得。
W2－W1
供试品中总灰分的含量（％）＝──────×100％ W W1 坩埚重（g） W 样品重（g）
W2 炽灼残渣与坩埚重之和（g）
本品总灰分不得过11.0％。
3.3二氧化硫残留量
按中国药典2010 年版第一增补本附录二氧化硫残留量测定法测定，取本品细粉10g，精密称定，置于两颈圆底烧瓶中，加水300ml—400 ml（应加水至没过氮气导气管的下端），取6mol/L盐酸10ml加入带刻度的分液漏斗中连接分液漏斗，并导入氮气至瓶底，。锥形瓶内加水125ml和淀粉指示液1 ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。连接回流冷凝管，在冷凝管上部连接导气管，将导气管插入250ml锥形瓶底部，开通氮气，调节氮气流量为0.2L/min，打开带刻度的分液漏斗的活塞，使盐酸流入烧瓶。加热圆底烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约3分钟后开始用0.01mol/l, 的碘滴定液滴定，吸收液置于磁力搅拌器上不断搅拌，至吸收液显蓝色或蓝紫色，持续30秒不消失，并将滴定的结果用空白校正，每1毫升的碘滴定液(0.01mol/l)相当于0.06mg的二氧化硫。
本品二氧化硫量不得过150mg/kg。 4、浸出物
主要使用仪器：电子分析天平、电热恒温干燥箱、水浴锅、蒸发皿等。 干益母草 取供试品适量，粉碎使能通过二号筛，并混合均匀后，取约2～4g，精密称定，置100～250ml的锥形瓶中，精密加水50～100ml，密塞，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。以干燥品按下式计算即得。
（W2－W1）×2
供试品中水溶性浸出物的含量（%）＝────────×100％ W×（1－W4） W 样品重（g） W1 蒸发皿重（g）
W2 残渣与蒸发皿重之和（g） W4 供试品的含水量（%）。
本品浸出物不得少于15.0%。 5、含量测定
主要使用仪器：电子分析天平、高效液相色谱仪等。
5.1干益母草 盐酸水苏碱 照高效液相色谱法（《中华人民共和国药典》附录VI D）测定。
5.1.1色谱条件与系统适应性实验 以丙基酰胺键和硅胶为填充剂；以乙腈-0.2%冰醋酸溶液（80：20）为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按盐酸水苏碱峰计算应不低于6000.
5.1.2对照品溶液的制备 取盐酸水苏碱对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。
5.1.3 供试品溶液的制备 取本品粉末（过二号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
5.1.4测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液10~20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。
本品以干燥品按下式计算即得： Ax×CR×Vx
供试品的含量（％）＝────────——×100％ AR×G×（1－W）×106 Ax 供试品的峰面积或峰高。 Vx 供试品的体积(ml) CR 对照品的浓度
AR 对照品的峰面积或峰高 G 供试品的重量(g) W 供试品的含水量
本品按干燥品计算，含盐酸水苏碱(C 7 H 13 NO 2 ·HCl)不得少于 0.50% 。 5.2盐酸益母草碱 照高效液相色谱法（《中华人民共和国药典》附录VI D）测定。
5.2.1色谱条件与系统适应性实验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%辛烷磺酸钠的0.1%磷酸溶液（24：76）为流动相；检测波长为277nm。理论板数按盐酸益母草碱峰计算应不低于6000.
5.2.2对照品溶液的制备 取盐酸益母草碱对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1ml含30μg的溶液，即得。
5.2.3测定法 分别精密吸取对照品溶液与盐酸水苏碱[含量测定]项下供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品以干燥品按下式计算即得： Ax×CR×Vx
供试品的含量（％）＝────────——×100％ AR×G×（1－W）×106 Ax 供试品的峰面积或峰高。 Vx 供试品的体积(ml) CR 对照品的浓度
AR 对照品的峰面积或峰高 G 供试品的重量(g) W 供试品的含水量
本品按干燥品计算，含盐酸益母草碱(C 14 H 21O5
N3 0.050% 。
HCl)不得少于
·
