紫光分光光度法、高效液相色谱法测定玉米须中 多糖及黄酮类物质的含量 彭磊 ，刘蕊 ，王丽娜 ，谢彩侠 ＃（１．河南中医药大学第三附属医院药学部，河南郑 ！Ｊ１、】４５００４６；２．河南 中医药大学药学院，河南郑州４５００４６） 中图分类号Ｒ９２７．２ 文献标志码Ａ 文章编号１６７２—２１２４（２０１７）０２—０２２２—０４ ＤＯＩ １０．１４００９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—２１２４．２０１７．０２．０２７ 摘要 目的：建立玉米须中多糖、黄酮类物质的测定方法，为玉米须饮片的优选提供依据。方法：采用紫光分光光度法测定多糖及 芦丁的含量，多糖的测定波长为４９０ ｎｍ，黄酮的测定波长为４００ ｎｍ。采用高效液相色谱法测定芹菜素的含量，色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ—Ｃｌ８柱（４．６ ｍｍ×２５０ ｍｍ，５ Ｉｘｍ），流动相为甲醇一０．２％磷酸溶液（ Ｖ＝５５：４５），流速为０．８ ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长为２７３ ｎＩｎ， 柱温为３０ 。结果：共测定ｌ５批样品，黄酮的含量范围是０．３８９ ６％～０．９５１ ２％、多糖的含量范围是３．３２２ ６％～９．５３６ ９％、芹菜素 的含量范围是０．００４ ７％～０．０２４ ６％。结论：本研究建立的测定方法稳定性好、准确度高，可作为优选玉米须饮片的测定方法 关键词 玉米须；紫外分光光度法：高效液相色谱法；黄酮：多糖 Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐ０ｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｓｔｉｇｍａ Ｍａｙｄｉｓ ｂｙ ＵＶ ａｎｄ ＨＰＬＣ ＰＥＮＧ Ｌｅｉ ，ＬＩＵ Ｒｕｉ ，ＷＡＮＧ Ｌｉ’ｎａ２，ＸＩＥ Ｃａｉｘｉａ２（１．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ ｔｏ Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅｎａｎ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５００４６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅｎａｎ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５００４６，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｐ０ｌｖｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｓｔｉｇｍａ ｍａｙｄｉｓ，ｓｏ ａｓ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｉｇｍａ ｍａｙｄｉｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ：Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｓｔｉｇｍａ ｍａｙｄｉｓ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ｐｏｌｖｓａｅｃｈａｒｉｄｅｓ ｗａｓ ４９０ ｎｍ，ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗａｓ ４００ ｎｍ．ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｐｉｇｅｎｉｎ，ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ Ａｇｉｌｅｎｔ ｚ０ＲＢＡｘ ＳＢ—Ｃ ｌ８（４．６ ｍｍ ｘ ２５０ ｎｌｍ，５ Ｉｘｍ），ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．２％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｖ：Ｖ＝５５：４５）ｗｉｔｈ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ ０．８ ｍｌ／ｍｉｎ．ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ２７３ ｎｍ ａｎｄ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ３０ ．ＲＥＳＵＩＪＴＳ：Ｔｏｔａｌｌｙ １５ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ．ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０．３８９ ６％ｔｏ ０．９５ １ ２％，ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｖｓａｅｃｈａｒｉｄｅｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ３．３２２ ６％ｔｏ ９．５３６ ９％，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｐｉｇｅｎｉｎ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０．Ｏ０４ ７％ｔ０ ０．０２４ ６％．Ｃ０ＮＣＬＵＳ１０ＮＳ：Ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｈａｓ ｈｉｇｈ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｇｏｏｄ ａｃｃｕｒａｃｙ，ａｎｄ ｉｔ ｃａｎ／ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｉｎ ｃｈｉｐｓ． ＫＥＹＷｏＲＤＳ Ｓｔｉｇｍａ ｍａｙｄｉｓ；ＵＶ；ＨＰＬＣ；Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；Ｐ０ｌｖｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ 玉米须ｓｔｉｇｍａ ｍａｙｄｉｓ是禾本科玉蜀黍属植物玉米Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．的干燥花柱和柱头…，在全国大部分地区均有栽培。 １材料 １．１仪器 现代药理研究结果表明，玉米须饮片中有多种药理活性物质， 具有较显著的利尿通淋、降低血糖、降低血压、增强免疫力等 作用 。玉米须饮片的投资成本低、保健品商业开发价值 高，但其含有黄酮类及多糖的含量测定方法尚没有较权威的 研究。本研究选取多糖、芦丁和芹菜素的指标性成分对玉米 须进行含量测定，建立玉米须黄酮类、多糖的测定方法，为玉 米须饮片的质量控制提供依据。 讲师。研究方向：中药质量控制。Ｅ－ｍａｉｌ：６３５９８０７３４＠ｑｑ．ｃｏｍ Ａｇｉｌｅｎｔ １２００型高效液相色谱仪（美捷伦科技公司）； ＷＦＺ ＵＶ一２０００型紫外一可见分光光度计（优尼柯仪器有限公 司）；ＡＬ２０４型万分之一天平（上海梅特勒一托利多仪器有限公 司）；ＦＡ２００４Ａ型电子分析天平（上海精天电子仪器有限公 司）；ＬＤ ２５—２型京力离心机（北京京立离心机有限公司）； ＥＹＥＬＡ Ｎ一１００型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）；１０１— ３ＡＢ型热鼓风干燥箱（北京中兴伟业仪器有限公司）。 １．２药品与试剂 １５批玉米须均购买于河南、河北当地不同药店，８批购于 河南的批号依次为：１５１１０９、１５１２０１、１５１０２８、１５１０１５、１５１１０７、 ＃通信作者：博士，教授。研究方向：现代仪器分析在中药质量评 价研究中的应用。Ｅ－ｍａｉｌ：１２１０５７１７３６＠ｑｑ．ｃｏｎ ・２２２・Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｒｕｇ．ｕｓｅ ｉｎ ｈｏｓｐｉｔａｌｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０１７ Ｖｏ１．１７ Ｎｏ．２ 中国医院用药评价与分析２０１７年第１７卷第２期 １５１１０５、１５１２０７、１５１２１２，７批购于河北的批号依次为：１５１１２７、 表１ 黄酮的加样回收率试验结果 Ｔａｂ １ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｓｔ ｏｆ ｔｌａｖｏｎｅ 艚 １５１１２０、１５１１０１、１５１１２１、１５１２０６、１５１２１７、１５１２１９，经河南中医 学院生药学科陈随清教授鉴定为禾本科玉蜀黍属植物玉米 Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．的雌花花柱和柱头。芦丁对照品（批号ＭＵＳＴ一 １２０４０３０２）、芹菜素对照品（批号ＭＵＳＴ一１３０５０５０ ５０）均购自成 珈。芎 取样量／ 样品含 加入量／ 测得量／ 加样回收 平均加样 ｇ 量／ ｍｇ ｒａｇ 彰％ 回收率／％ ＲＳＤ／ ％ 都曼斯特生物科技有限公司，纯度≥９８％；甲醇为色谱纯 （ＴＥＤＩＡ公司）；无水葡萄糖为分析纯（天津市科密欧化学试剂 开发中心），其他试剂均为分析纯。 ２方法与结果 ２．１黄酮的含量测定 ２．１．１供试品溶液的制备：取玉米须饮片适量，粉碎，过５０目 筛，精密称取２．０ ｇ，加入精密量取的６０％乙醇６Ｏ ｍｌ，于８０℃ 热过滤，重复３次，合并滤液，静置除去杂质。取上清液５Ｏ ｍｌ， 水浴回流２ ｈ，取出放凉，用６０％乙醇补足质量，在４ ０００ ｒ／ｒａｉｎ 转速下离心１０ ａｉｒｎ，取上清液即得 。 ２．１．２对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品５．９５ ｍｇ，置 于２５ ｍ１容量瓶中，加入６０％乙醇溶解，定容至刻线，即得 ０．２３８ ｍｇ／ｍ１的对照品溶液。 ２．１．３标准曲线的绘制：精密量取“２．１．２”项下对照品溶液 ０．０、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０ ｍｌ，置于２５ ｍｌ容量瓶 水浴加热浓缩，加无水乙醇使其体积分数降至７５％，于４℃静 置下过夜。采用定量滤纸过滤，在常温条件下干燥后滤纸剪 碎，置于具塞锥形瓶中，精密量取蒸馏水５０ ｍｌ加入锥形瓶中， ９０ ｑＣ水浴加热３ ｈ，常温放凉，补足质量。在４ ０００ ｒ／ｒａｉｎ转速 下离心１０ ｒａｉｎ，精密量取上清液１０ ｍｌ，置于５０ ｍｌ容量瓶中， 用蒸馏水定容至刻线，即得 。 ２．２．２对照品溶液的制备：取无水葡萄糖，于１０５℃下干燥 中，分别加入０．１ ｍｏｌ／ｍｌ三氯化铝甲醇溶液２Ｏ ｍ１，用６０％乙 醇溶液定容至刻线。以没有加入对照品试剂的作为参比试 至恒重，精密称取０．０９９ ８ ｇ，置于１００ ｍｌ容量瓶中，加蒸馏水 振荡至全部溶解并定容至刻线，即得。 ２．２．３标准曲线的绘制：精密量取对照品溶液１．０、２．０、３．０、 ４．０、５．０、６．０、７．０ ｍｌ，置于１００ ｍ１容量瓶中，加蒸馏水定容至 刻线，摇匀，得到葡萄糖溶液的浓度依次为９．９８、１９．９６、 ２９．９４、３９．９２、４９．９０、５９．８８、６９．８６ ｇ／ｍｌ。依次精密量取上述 溶液１ ｍｌ，置于具塞试管中，依次加入５％苯酚溶液０．６ ｍｌ，浓 硫酸４ ｍｌ，盖上塞子振荡混匀，于４０℃下水浴加热１５ ｒａｉｎ，采 用紫外 可见分光光度计于４９０ ｒｉｍ处测定Ａ，以Ａ为纵坐标， ㈣ 咖 ㈣㈣ 液，振荡后静置１０ ｒａｉｎ。采用紫外，可见分光光度计于 １ ５ ２ ｌ ３ ｎｕ １ ２ ７ ４００ ａｍ处测定吸光度（Ａ），以Ａ为纵坐标，样品中芦丁的浓 如如如如如∞ 如如 度为横坐标，得回归方程为：Ａ＝０．０２４ ６ Ｃ＋０．０００ ５，Ｒ ＝ ０．９９９ ３。表明芦丁在０～３８．０８ 良好线性关系。 ∞∞＆乱ｍｌ的范围内与吸光度呈 ∞∞如如舶∞∞ ２．１．４ 精密度试验：精密称取“２．１．２”项下对照品溶液 ３．０ ｍｌ，置于２５ ｍｌ容量瓶，加６０％乙醇定容至刻线，即得浓度 ∞ 控∞Ｈ；兮斟 为２８．５６ ｍｌ的溶液，按照“２．１．３”项下方法对同一样品重 ∞鹋 笛∞丝叭 乱 ｎ Ｌ ｎ 以葡萄糖浓度为横坐标，得回归方程：Ａ＝０．００８ ７ ｃ＋ ０．２０１ ９，Ｒ ＝０．９９９ ２，表明葡萄糖浓度在１Ｏ～７０ 与吸光度具有良好线性关系。 ２．２．４精密度试验：取无水葡萄糖对照品适量，按照“２．２．２” 项下方法制备浓度为２９．９４ ｍｌ的对照品溶液，按“２．２．３” 复测量６次，计算其浓度，芦丁浓度的ＲＳＤ＝１．叭％，表明仪器 帆 精密度良好。 ２．１．５重复性试验：精密称取样品（批号：１５１１０９）适量，按照 ｍｌ之间 “２．１．１”项下方法制备供试品溶液，共６份。采用紫外－可见 分光光度计于４００ ｉｌｍ处测定吸光度（Ａ），计算其浓度，芦丁浓 度的ＲＳＤ＝１．１０％，表明本方法重复性良好。 ２．１．６稳定性试验：取“２．１．１”项下供试品溶液（批号： １５１１０９）适量，分别于室温下放置０、０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、 ３．０、３．５、４．０ ｈ时测定吸光度。结果芦丁浓度的ＲＳＤ＝ １．８８％，表明供试品溶液在４ ｈ内稳定性良好。 ２．１．７加样回收率试验：取已知含量样品（批号：１５１１０９） ９份，粉碎，过５０目筛，分别精密称取１．０ ｇ，加入芦丁对照品， 按照“２ １．１”项下方法制备供试品溶液，测定含量及加样回收 率，见表１。 粥 项下方法对同一样品重复测量６次，计算样品葡萄糖浓度，得 ＲＳＤ＝１．４％，表明仪器精密度良好。 ２．２．５稳定性试验：取“２．２．１”项下供试品溶液（批号： １５１１０９）适量，分别于室温下放置０、０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、 ３．０、３．５、４．０ ｈ时测定吸光度。结果葡萄糖浓度的ＲＳＤ＝ ０．５％，表明本方法稳定性良好。 ２．２．６重复性试验：精密称取样品（批号：１５１１０９）适量，按照 “２．２．１”项下方法制备供试品溶液，共６份。采用紫外一可见 分光光度计于４９０ ｎｍ处测定Ａ，计算葡萄糖浓度，结果葡萄糖 浓度的ＲＳＤ＝１．４％，表明本方法重复性较好。 ２．２．７加样回收率试验：取已知含量样品（批号：１５１１０９） ２．１．８样品含量测定：取各批样品适量，分别按照“２．１．１”项 下方法制备供试品溶液，再按照“２．１．３”项下方法测定并计算 含量，见表４。 ２．２多糖含量的测定 ９份，按照“２．２．１”项下方法制备供试品溶液，加入无水葡萄糖 对照品适量，测定吸光度及加样回收率，见表２。 ２．２．８样品含量测定：取各批样品适量，分别按照“２．２．１”项 ２．２．１ 供试品溶液的制备：称取样品５０ ｇ，加２５倍量水（体积 与质量之比），浸泡３０ ａｉｒｎ，武火煮沸，文火煎煮３０ ｍｉｎ，趁 中国医院用药评价与分析２０１７年第１７卷第２期 下方法制备供试品溶液，再按照“２．２．３”项下方法测定并计算 含量，见表４。 Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｒｕｇ－ＩＩＳｅ ｉｎ ｈｏｓｐｉｔａｌｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０１７ Ｖｎ１．１７ Ｎ０．２・２２３ 表２ 多糖的加样回收率试验结果 Ｔａｂ ２ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｓｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ６３．７５、８５．００、１２７．５０、２５５．００ ｍ１对照品溶液，按照 “２．３．３”项下色谱条件进样，记录峰面积。以芹菜素质量浓度 为横坐标（ ）、峰面积为纵坐标（Ｙ），得到线性回归方程为】，＝ ３４．８１１ ＋１２０．８１，ｒ２＝０９９９ ３。结果表明，芹菜素在４．４０～ ｊ《ｕｖ越 ．２５５．００ Ｉ．Ｌｇ范围内线性关系良好。 ∞∞如∞鲫∞如如Ｏ ２．３．５精密度试验：精密吸取“２．３．１”项下对照品溶液适量， 按照“２．３．３”项下色谱条件连续进样６次，记录峰面积。结果 芹菜素峰面积的ＲＳＤ＝０．２３％（／２＝６），表明仪器精密度良好。 ２．３．６稳定性试验：精密吸取“２．３．１”项下对照品溶液适量， 于室温下放置０、２、４、６、８、１０、１２ ｈ时分别按“２．３．３”项下色谱 ２．３芹菜素的含量测定 条件进样测定，记录峰面积。结果芹菜素峰面积的ＲＳＤ＝ ０．３１％，表明对照品溶液在１２ ｈ内质量基本稳定。 ２．３．７重复性试验：取样品细粉（批号：１５１１０９）适量，共６ ２．３．１ 对照品溶液的制备：精密称取芹菜素对照品２．５５ ｍｇ， 置于１０ ｍｌ容量瓶中，加入纯甲醇使其全部溶解，定容至刻线， 摇匀，用０．４５ ｍ的微孑Ｌ滤膜过滤即得质量浓度为 ０．２５５ ｍｇ／ｍｌ的对照品溶液。 份，分别按照“２．３．２”项下方法制备供试品溶液，再按照 “２．３．３”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，芹菜素 峰面积的ＲＳＤ＝１．７３％（ｎ＝６），表明本方法的重复性良好。 ２．３．８加样回收率试验：取已知含量的样品（批号：１５１１０９） 适量，共９份分为３组，粉碎，分别加入一定质量的芹菜素标 ２．３．２供试品溶液的制备：取玉米须饮片粉碎，粉末过５０目 筛，精密称取６．０ ｇ置于圆底烧瓶中，加入精密量取的６０％乙 醇１８０ ｍｌ，摇匀，在８０℃水浴加热下热回流２ ｈ，过滤，滤液置 于钳锅中水浴蒸干；加入甲醇溶解浓缩物，移至１０ ｍｌ容量瓶， 定容至刻线；超声处理３０ ｒａｉｎ后，用０．４５ Ｉｘｍ微孔滤膜过滤， 即得 。 准品，按照“２．３．２”项下方法制备供试品溶液，再按照“２．３．３” 项下色谱条件进样测定并计算加样回收率，见表３。 表３芹菜素的加样回收率试验结果 Ｔａｂ ３ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｔｅｓｔ ｏｆ ａｐｉｇｅｎｉｎ ２．３．３ 色谱条件：色谱柱为Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ ＳＢ—Ｃ． 柱 （４．６ ｍｍ ｘ２５０ ｍｉｌｌ，５ ｍ），流动相为甲醇－０．２％磷酸水溶液 （ ：Ｖ＝５５：４５），流速为０．８ ｍｌ／ｍｉｎ，紫外检测器波长为 ２７３ ｎｍ，色谱柱柱温为３０℃，样品进样量为１Ｏ ｌ。理论塔板 数不低于６ ０００，见图１。 ２．３．９样品含量测定：取各批样品适量，分别按照“２．３．２”项 下方法制备供试品溶液，再按照“２．３．３”项下色谱条件进样测 定并计算含量，见表４。 表４多糖、黄酮和芹菜素的含量测定结果 Ｔａｂ ４ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｓ ｏｆ ｔｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ｒｕｔｉｎ ａｎｄ ａｐｉｇｅｎｉｎ ４００ ０ 量３００ ２ｏｏ 毯 ｌＯＯ ０ ０ ２ ４ ６ ８ ｝０ Ｂ ｌ２ １４ １６ １８ ２Ｏ 时间／ｍｉｎ Ａ．对照品溶液；Ｂ．供试品溶液 Ａ．ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ；Ｂ．ｔｅｓｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎ 图１高效液相色谱图 Ｆｉｇ １ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ２．３．４线性关系考察：精密称量芹菜素对照品，置于容量瓶 中，按照“２．３．１”项下方法配制成质量浓度为４．４０、４４．００、 ’（下转第２３１页） ２２４‘Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｒｕｇ—ｕｓｅ ｉｎ ｈｏｓｐｉｔａｌｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０１７ Ｖ０Ｊ．１７ Ｎｏ２ ．中国医院用药评价与分析２０１７年第ｌ７卷第２期 肪肝病３０例［Ｊ］．中医研究，２０１５，２８（９）：２０－２１． ［１２］ 邹祥发，陈福刚，王淑敏．清肝汤治疗非酒精性脂肪肝３Ｏ例 ［２３］ 马红学，任顺平，李朝喧，等．健脾抑脂方治疗非酒精性脂肪肝 ４Ｏ例临床疗效观察［Ｊ］．中国民间疗法，２０１６，２４（１１）：４２＿４３． ［Ｊ］．陕西中医，２００８，２９（１）：２０－２１． ［１３］ 文彬，贺松其，蒋长盛，等．清肝调脂方治疗非酒精性脂肪肝６０ 例疗效观察［Ｊ］．新中医，２００７，３９（１２）：８４－８５． ［１４］ 陈利平，陈丹丹．疏肝和胃调脂方治疗非酒精性脂肪肝４ｌ例临 ［２４］ 林振文，程珠琴，李晟，等．降脂膏方治疗非酒精性脂肪肝的临 床观察［Ｊ］．海峡药学，２０１６，２８（３）：１１１－１１３． ［２５］ 吴良勇，朱斌．降脂化湿汤治疗非酒精性脂肪肝７２例临床观察 ［Ｊ］．中国医院药学杂志，２０１６［２０１６－１１－２５］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ． ｎｅｔ／ＫＣＭＳ／ｄｅｔａｉｌ／４２．１２０４．Ｒ．２０１６１ １０３．２２２３．１００．ｈｔｍｌ？ｕｉｄ＝ 床观察［Ｊ］．中国民族民间医药，２０１３，２２（２４）：３８—３９． ［１５］ 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医药卫生，２０１６，３２（９）：１３８５—１３８６． （上接第２２４页） ［３０］ 吴泰相，李幼平，卞兆祥，等．实施临床试验报告规范，提高临床 试验透明度［Ｊ］．中国循证医学杂志，２００７，７（８）：５５１－５５４． （收稿日期：２０１６—１１－２５） ［３］ Ｈａｓａｎｕｄｉｎ Ｋ，Ｈａｓｈｉｍ Ｐ，Ｍｕｓｔａｆａ Ｓ．Ｃｏｒｎ ｓｉｌｋ（Ｓｔｉｇｍａ ｍａｙｄｉｓ）ｉｎ ３讨论 ３．１黄酮的提取工艺优选 ｈｅａｈｈｃａｒｅ：ａ ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］． Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２０１２，１７（８）：９６９７－９７１５． 黄酮的常用提取工艺是超声波处理和热回流提取…。 ， 本研究比较了该２种不同提取方法和不同实验条件对玉米须 黄酮类化合物得率的影响，以确定最佳工艺。预实验中发现， ［４］ 刘娟，杨光，韩晓强．玉米须多糖提取及其含量测定方法［Ｊ］．黑 龙江医药科学，２００５，２８（５）：９－１０． ［５］ 黄晔，龙光锦，姜林华，等．玉米须总黄酮的提取及鉴别［Ｊ］．时 珍国医国药，２００６，１７（６）：１００８－１００９． ［６］ 黄兴富，黎其万，刘宏程，等．高效液相色谱法同时测定苦荞中芦 采用超声波处理的黄酮提取率为０．１３％，采用热回流处理的 黄酮提取率为０，４８％，热回流处理的黄酮提取率是超声波处 理的３—４倍。因此，最终采用热回流提取法对玉米须中的黄 酮进行提取。 丁、槲皮素和山柰酚的含量［Ｊ］．中成药，２０１１，３３（２）：３４５．３４７． ［７］ ［８］ 肖作奇．中药多糖质量控制研究进展［Ｊｊ．中国医药导报，２０１５， １２（４）：１５９—１６４． ３．２ 芹菜素含量测定的色谱条件优选 罗光宏，李金燕，叶生宝，等．黄参多糖提取工艺参数优化［Ｊ］． 食品科学，２０１３，３４（２４）：４０４５． 预实验中探讨了不同体积比的流动相（甲醇－０．２％磷酸水 溶液）的实验效果，即 ：Ｖ＝５３：４７、 ：Ｖ＝５４：４６、 ：Ｖ＝５５：４５、 ：Ｖ＝５６：４４、ｌ，：Ｖ＝５７：４３，结果显示流动相为甲醇－０Ｌ２％磷酸水 ［９］ 张宏梅，崔佰吉，张秀荣．ＨＰＬＣ同时测定灯延颗粒中灯盏乙素、 原阿片碱、芹菜素和延胡索乙素［Ｊ］．中国实验方剂学杂志， ２０１４，２０（２４）：５７－６０． 溶液（ ：Ｖ＝５５：４５）时与杂质的分离度较好，且出峰时间适中 。 ３．３芦丁、多糖含量测定的波长优选 本研究对供试品和对照品均进行了全波长扫描，结果显示 ［１Ｏ］ 解军波，张彦青，鲁晓翔．高效液相色谱法测定玉米须中芹菜素 的含量［Ｊ］．食品工业科技，２０１０，３１（１）：３７６－３７７． 王光霞，李国婧，高雅黛，等．超声波辅助提取柠条叶中芦丁含 量的测定［Ｊ］．内蒙古农业大学学报：自然科学版，２０１５，３６（１）： ６５＿６７． 多糖的供试品、对照品均在４９０ ｎｍ处有１个较高的吸收峰，而 芦丁的供试品、对照品均在４００ ｎｍ处有１个吸收峰 引。本研 究结果表明，黄酮含量范围是０．３８９ ６％～０．９５１ ２％，多糖含量 ［１２］ 田智勇，柴郑，徐亚菲，等．正交设计优选枳棋子中总黄酮的提 取工艺［Ｊ］．河南大学学报：医学版，２０１５，３４（４）：２４７－２５１． ［１３］ 黄艳菲，彭镰心，丁玲，等．荞麦和商品苦荞茶中芦丁含量的测 范围是３．３２２ ６％～９．５３６ ９％，芹菜素含量范围是０．００４ ７％～ ０．０２４ ６％。 参考文献 ［１］ 张育光．玉米须化学成分、药理作用及其应用研究进展［Ｊ］．中 国中医药现代远程教育，２００７，５（２）：３４．３５． ［２］ 苗明三，孙艳红．玉米须总皂苷降糖作用研究［Ｊ］．中国中药杂 志．２００４．２９（７）：７１１－７１２． 定［Ｊ］．现代食品科技，２０１２，２８（９）：１２１９—１２２２． ［１４］ 刘本国，杨继国，邱晓斌，等．芹菜素的制备、鉴定与纯化的研究 ［Ｊ］．现代食品科技，２０１３，２９（１２）：２９４７－２９５２． ［１５］ 李计萍．中药新药研究中多糖含量测定方法探讨［Ｊ］．中国中药 杂志，２０１４，３９（１７）：３３９２－３３９４． （收稿日期：２０１６．１０－２９） 中国医院用药评价与分析２０１７年第１７卷第２期 Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｒｕｇ．ｕｓｅ ｉｎ ｈｏｓｐｉｔａｌｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０１７ Ｖｎ１．１７ Ｎ０．２・２３１・
