２０１０年６月下 第２卷第１２期 Ｊｕｎｅ ２０１０ Ｖｏ１．２ Ｎｏ．１２ 中国中医药咨讯 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ・１７５・ 改良法大鼠急性肝损伤模型建立的研究２１ ２６ 宋彬彬刘旭 （沈阳军区总医院，辽宁沈阳，１１００１６） 【摘要】目的：通过改良法建立急性肝损伤模型。方法：将大鼠随机分组，模型组将四氯化碳（ｃｃＬ４）一大豆油溶液腹腔注 射后对其进行部分肝叶切除术；假手术组腹腔注射等剂量的生理盐水开腹后即关腹，检测大鼠血清谷ＡＬＴ、ＡＳＴ及ＴＢＩＬ，观察 肝脏改变。结果：成功构建大鼠急性肝损伤模型，且大鼠存活率高，生化指标变化明显。结论：改良法建立的大鼠急性肝损伤模 型将为肝脏疾病的基础与临床研究提供可靠的试验平台。 【关键词】肝损害模型；改良法；生化指标 针对肝终末期疾病原位肝移植仍是治疗的最佳手段， 但是，其价格昂贵、一肝难求，并且存在免疫排斥，无法服务 于大多数的肝衰竭患者，因此需要探索新的治疗方法，这就 迫切需要建立科学可靠的动物模型，用于肝损害的临床及 基础研究。本文探讨了通过改良法建立大鼠急性肝损害模 型的方法。 材料与方法 １实验动物及试剂 成年、健康、清洁级雄性体重１８０—２５０ｇ雄性ｓＤ大鼠 ２０只，清洁级，由沈阳军区总院实验动物中心提供。实验操 作遵循《实验动物学》的有关规定。动物在实验前在实验室 适应性饲养１周。实验前１２小时禁食，自由饮水。 四氯化碳溶液（ＣＣＬ４）购自广东东达城化有限公司。 ２．急性肝损伤模型建立 将大鼠随机分为两组，每组１０只。模型组给予体积分 数为２５％的ＣＣＬ４一大豆油溶液０．２ｍｌ／ｌＯＯｇ腹腔注射；２４小 时后对其进行部分肝叶切除：１％戊巴比妥钠（４ｍｌ／１００ｇ）麻 醉后固定于手术台上。常规术野剃毛、消毒、铺巾，沿前正中 线自剑突向尾侧作约３ｃｍ切口，暴露肝脏，拉出部分肝脏， 离断远端肝叶，用１号幕丝线连续缝合关闭腹腔。术后皮下 注射生理盐水（２ｍｌ／１００ｇ）以补充丢失的体液，术后大鼠自 由饮水，仍禁食。 假手术组：ｌ０只，手术方式同模型组，但腹腔内注射生 理盐水０．２ｍｌ／ｌＯＯｇ，开腹后不进行部分肝叶切除术，开腹后 即关腹。 ３血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＢＩＬ测定 术后２４小时经腹主动脉取血，每只约５ｍｌ，分离血清，取 少量用以检测胆酶值。并取出大鼠肝脏，观察病理改变。 结果 １两组大鼠术后２４小时生存率 造模组造模后２４小时生存率为９０．Ｏ％，假手术组大鼠 造模后２４小时生存率为１００％。两组生存率比较Ｐ＞０．０５， 差异无统计学意义。 ２血清ＡＩＪＴ、ＡＳＴ、ＴＢＩＬ测定 各组血清胆酶值变化显示：造模组ＡＩＪｒｒ（４９６．７０± ３５．６８Ｕ／Ｌ）、ＡＳＴ（７３７．２６±４０．１２Ｕ／Ｌ）较假手术组ＡＬＴ （５３．９０±５．０９Ｕ／Ｌ）、ＡＳＴ（１４９．７３±２７．４３Ｕ／Ｌ）显著增高，差异 有显著性（Ｐ＜Ｏ．００１），造模组ＴＢＩＬ（３．０５±０．５３ｍｍｏｌ／Ｌ）较假 手术组（１．３６±０．４８ｍｍｏ１］Ｌ）增高，差异有统计意义（Ｐ＜ ０．０５）。 ３大鼠肝脏肉眼观察 造模后大鼠肝脏组织出现充血、水肿、坏死。解剖发现： 模型组大鼠造模后肝脏颜色晦暗，肝脏可见水肿、出血、坏 死，腹腔内及腹膜后多处可见腹水。假手术组大鼠肝脏肉眼 观无明显变化，呈棕红色，颜色均匀一致，光泽度好，腹腔内 无腹水。 ＣＣＬ４腹腔注射制作急性肝损伤模型的常规剂量为 ０．０５ ｍＬ／１００ｇ体重，然后以植物油配成合适浓度给予，一般 为（１：２－１：４），此剂量的ＣＣＬ４配以植物油的溶液不会导致大 鼠死亡。ＣＣＩＡ致肝毒作用的主要机制是自由基的形成以及 引发的链式过氧化反应。ＣＣＩＡ在受到肝微粒体酶活化成为 三氯甲烷自由基（ＣＣＬ３），使得蛋白合成障碍，且使得脂质 分解代谢紊乱［２１。并且可引起细胞膜的变性损伤以及酶渗漏 等细胞病变以及坏死［３１。本实验按０．２ ｍＬ／１００ｇ体重给予 ２５％（体积比）ＣＣＩＡ植物油溶液腹腔内注射制作急性化学 性肝损伤模型［４】。在此基础上行肝部分切除术，存活率决定 于受化学损伤的残肝的代偿能力。此种方法所得的肝损伤 模型具有存活率较高，且成模时间短等优点。 造模组大鼠胆酶值均高于对照组，说明其具备了急性 肝损害动物实验要求，是一种可行高效的实验模型建立方 法。 参考文献 『１１马永贵，罗桂花，陈志小鼠四氯化碳急性肝损伤模型稳定性初 探．青海师范大学学报．２００６，１：８８—９１． ［２］ＴＯＭＡＳＩ Ａ．Ｆｒｅｅ－ｒａｄｉｃａｌ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｏｆ ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ ｒａｔ ｌｉｖｅｒ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｆｉａ．Ａ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ， １９８７，２４６（２）：３１３—３１７． ［３］ＬＥＥ ＣＨ．Ｐｒｏｔｃｅｔｉｖｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｇｌｙｅｙｒｒｈｉｚｉｎ Ｏｉｌ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｂｉｏｌ Ｐｈａｒｍ Ｂｕｌｌ，２００７，３０ （１０）：１８９８—１９０４． ［４１ＩＬＥＤＡ Ｈ．Ｒｈｏ－ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｄａｍａｇｅ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｃａｒｂｏｎ ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ ｒａｔｓ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｇａｓ— ｔｍｉｎｔｅｓｔ ＬｉｖｅｒＰｈｙｓｉｏｌ，２００７，２９３（４）：９１１—９１７．
