冷冻干燥菌种的活化方法
一、菌种管开启方法
1用浸过75%酒精的脱脂棉擦净菌种管。
2将菌种管顶端在火焰上加热,注意避免直接加热菌体或加热过度。3将无菌水滴至加热过的菌种管顶端,使玻璃开裂。4用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。二、菌种活化培养
1.用无菌吸管吸取0.3mL-0.4mL适宜(※)的液体培养基,滴入菌种管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解成悬浮状液体。
一般细菌建议使用胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)、脑心浸液肉汤(BHI)等高营养的培养基;
嗜盐性弧菌建议使用含3%-3.5%氯化钠的胰蛋白胨大豆肉汤;乳酸菌建议使用MRS肉汤;真菌建议使用真菌培养基;
2.取约0.2mL菌悬液,转接于特定的琼脂培养基斜面或平板上,剩余的菌液注入特定的液体培养基(3mL-4mL)内,然后再按照菌种的特性,在一定温度下进行培养。三、注意事项
1菌种活化前,请将冻干菌种管冷藏保存在5℃-10℃环境下。
2厌氧菌的培养,如无特别说明,自开封至接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态。
3菌种经过冷冻干燥后,生长延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长。4菌种活化及使用过程应做好安全防护工作。
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